NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent?
适用于Ion Torrent 二代测序平台的文库定量试剂盒
NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent 是一套基于 qPCR 方法对 Ion Torrent 平台测序文库进行 DNA 分子数绝对定量分析的试剂盒。它可以对两端含有 Ion Torrent A、trP1 芯片序列的各种类型 DNA 片段文库进行高特异性的快速定量,检测结果灵敏度高,准确度高,重复性好,适用于大多数qPCR仪器。
产品优势
灵敏度高 —能检出低至 0.0083 pM 的文库样品;
特异性强 —使用抗体修饰法热启动 DNA 聚合酶,避免了 PCR 扩增前的非特异性结合;文库定量引物采用特殊算法设计,不会形成引物二聚体;
扩增范围广—能检测平均片段长度 1 kb 以内的文库;
扩增效率高(E>0.92),实验重复性好(R2 >0.99)。
本试剂盒包含以下四种成分:
1. 文库DNA定量标准品(qPCR DNA standard for Ion Torrent):经过精确定量和严格质控的六份十倍比梯度稀释的双链DNA片段溶液(83 pM – 0.00083 pM),用于标准曲线制作;
2. 文库定量引物(qPCR primer Mix for Ion Torrent):匹配Ion Torrent A和trP1芯片序列、并经过优化设计的一对qPCR引物;
3. 2×qPCR预混液(2×qPCR Mix for Ion Torrent):含有经性能优化的热启动DNA聚合酶、qPCR反应缓冲液和SYBR Green染料等qPCR反应所需成分;
4. ROX参比染料(ROX Reference Dye)。

图1.DNA标准品扩增曲线与熔解曲线。使用NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent检测6个10倍梯度稀释的文库DNA定量标准品,每个标准品平行重复2次。结果显示,试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特性。

图2.DNA标准品扩增产物电泳图。使用NGSquant? Library qPCR Kit for Ion Torrent扩增文库DNA标准品得到的qPCR产物,电泳显示条带均一,无非特异扩增现象。
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